調整好氮氣鋼瓶所需壓力(鋼瓶上減壓閥的輸出壓力),一般為0.1左右。打開控制面板上的F2開關,同時打開真空泵開關,讓其抽走過取樣室的空氣。氮氣充入操作室內,以手套向外伸直為止(不能過多充入,小心手套爆裂。),此時應立即關閉F2開關。然后打開F3與F4的開關,使操作室內的氣過渡到過道室,直到手套向內伸直為止,為防止手套爆裂,此時應馬上關閉F3與F4的開關,這樣氮氣的一次置換完成了,重復以上方法,做5到6次,做完后,整個氮氣的置換就完成了,關閉減壓閥和鋼瓶總閥。
混合氣體的置換方法:調整好混合氣體鋼瓶所需壓力(鋼瓶上減壓閥的輸出壓力),一般為0.1左右。打開控制面板上的F3開關,同時打開真空泵開關,讓其抽走取樣室內的空氣。混合氣充入操作室內,以手套向外伸直為止(不能過多充入,為防止手套爆裂。),此時應立即關閉F3開關,然后打開F1和F2開關,使操作室內的氣過渡到取樣室內,直到手套向內伸直為止,為防止手套爆裂此時應立即關閉F1與F2的開關,這樣混合氣的一次置換完成了,重復以上方法,做5到6次,做完后,整個氣體的置換就完成了,這時操作室內就形成了厭氧環境,并關閉真空泵開關。打開F5,并調節面板上的穩流閥和流量計,使流量計的流量為10ml/min。直至全部實驗結束,關閉減壓閥和混合氣總閥。
真正達到你所需的厭氧狀態,還要用鈀粒分篩來吸收操作室內的剩余氧分子,最后用指示條(指示條的藍色上加一滴純水)來測量操作室是否還有氧,指示條變色表明已經是厭氧環境了,此時就可以進行厭氧菌的培養了。
實驗中,如果忘記了做實驗的工具或別的東西,需要拿到操作室里去,首先打開取樣室的外門,把所需的東西放入取樣室內,關緊外門,打開真空泵開關,再讓其抽取樣室內的空氣。一般壓力為-0.06到-0.08左右,到了后關閉真空泵開關,打開F1開關,向過道室內充入氮氣,使壓力表上的指示針回落到零位,關閉F1開關,再打開真空泵開關,再抽真空,到壓力后,關閉真空泵開關。打開F4開關,向取樣室內充混合氣直止壓力表指針回落到零位,關閉F4開關,打開取樣室內門,把東西挪到操作室內后,關閉內門,如果從操作室向外拿就直接打開取樣室門(置換好氣體后沒有打開過取樣室的外門的前提下),把東西放入取樣室后關閉內門,再打開外門就可把東西拿出來了。取樣室不是在置換氣體狀態中壓力應為零.